Följer livet för personalen i det fiktiva 21:a distriktet, som hyser både uniformerade poliser och departementets elitförband, Intelligence Unit, medan de dagligen kämpar för att hålla staden Chicago, Illinois säker.

Fyra år efter att Jack Bauer gått under jorden lyckas CIA-agenterna i London fånga Bauer; en av deras agenter vid namn Kate Morgan misstänker att han planerar något, och president Hellers tillstånd väcker oro hos hans personal.

I Gotham City har Riddler hemlig information om den topphemliga Task Force X som han hotar att göra offentlig, men innan Amanda Waller hinner låta döda honom fångas han av Batman. Med Riddler nu inspärrad på Arkham Asylum sammanför Amanda Waller åter Suicide Squad av fångade superskurkar med uppdraget att infiltrera den rättspsykiatriska anstalten för att hämta Riddlers information. Ledda av Deadshot tar sig detta hemliga specialteam in i anstalten, bara för att möta komplikationer både inifrån och utifrån teamet med hemliga agendor och dubbelkorsningar överallt. Samtidigt har Batman sina egna bekymmer med en brådskande jakt på Jokerns dödliga bomb som hotar Gotham City. Så småningom konvergerar alla dessa aktörer på Arkham Asylum för en slutstrid som få kommer att överleva.

På 1980-talets Louisiana arresterar en polisdetektiv en yrkesmördare. För att få vara med sin fru och nyfödda barn blir han informatör och hjälper till att slå ner Sydstatens mäktigaste kriminella organisation.

Några av Sin Citys hårdkoktaste invånare korsar vägar med några av dess mer föraktade invånare.